Çehov'un Not Defteri'nde ele aldığı en önemli insan ilişkisi teması, yalnızlık ve hayal kırıklığıdır. Yazar, bireylerin sosyal hayattaki zorluklarını ve içsel çatışmalarını derinlemesine işler. Bu bağlamda, karakterlerin birbirleriyle olan ilişkilerindeki kopukluk ve iletişimsizlik, insan doğasının karmaşıklığını gözler önüne serer. Çehov, okuyucuya yalnızlığın ve insan ilişkilerinin getirdiği zorlukların evrenselliğini hissettirir.